Qual è la scadenza media dei prodotti della BioLegend?
La maggior parte dei prodotti (a meno di indicazioni diverse) hanno una scadenza media, garantita, di 1 anno dalla data di consegna, se ben conservati e maneggiati secondo le istruzioni che accompagnano ogni singolo prodotto.

Come andrebbero conservati i reagenti della BioLegend?
Per la maggior parte dei reagenti è raccomandato una conservazione, non diluita, a 4°C. Molti prodotti per biologia cellulare e proteina ricombinanti liofilizzate devono essere conservate a -20°C. Proteine ricombinanti ricostituite devono essere conservate a -70°C (dopo il primo scongelamento, aliquotarle e poi ri-congelare -70°C. Riferirsi sempre alla scheda tecnica allegata al prodotto per le istruzioni sulle caratteristiche per una corretta conservazione.

Come vengono spediti i prodotti BioLegend?
La maggior parte dei prodotti viene spedita a temperatura ambiente. Proteine ricombinanti (comprese quelle incluse nei ELISA MAXTM Sets) vengono spedite in ghiaccio secco con una spedizione a parte.

In quali formati e per quali applicazioni vengono proposti gli anticorpi della BioLegend?
Gli anticorpi della BioLegend sono offerti per le seguenti applicazioni/format:

Biolegend offre servizi "Custom"?
SI! Grazie ad un team esperto, BioLegend si pone nelle migliori condizioni per offrire un ampio numero di servizi "custom".
Produzione di anticorpi: Colture Cellulari, purificazione e coniugazione di anticorpi della BioLegend o anticorpi di proprietà del cliente
"Fragmentation": F(ab')2, F(ab') possibilità di anticorpi LEAFTM (Low Endotoxin, Azide-Free format) per studi funzionali modifiche di concentrazioni o tamponi.
Confezionamenti "Bulk"

Qual è il vantaggio nell'ordinare anticorpi nel formato a test invece di mg?
Gli anticorpi offerti per numero di test vengono accuratamente pre-titolati per una resa ottimale con metodica citofluorimetrica. Quelli offerti per piastre sono ottimizzati per metodica ELISA. Anticorpi per biologia cellulare vengono offerti in µl e sono pre-titolati per dare i migliori risultati in Western Blot.

Qual è la politica sulla qualità adottata dalla BioLegend?
100% Garanzia di soddisfazione. Se un prodotto BioLegend non corrisponde alle caratteristiche dichiarate sulla scheda tecnica, il prodotto verrà sostituito oppure rimborsato al 100%.

Quando sono disponibili più di un clone, come scelgo il prodotto giusto?
Controllare la scheda tecnica per verificare le applicazioni /caratteristiche di ogni singolo clone.
Se avete ancora dubbi, contattate la Prodotti Gianni S.p.A.
Numero Verde 800 832 027 - telefono 02 5097 220 - fax 02 5097 276
E-mail: info@prodottigianni.com

Quali sono le concentrazioni degli anticorpi Biolegend?
Per gli anticorpi offerti in mg, le tipiche concentrazioni (se non diversamente specificato) sono le seguenti:

APC, APC/Cy5.5, APC/Cy7, PE, PE/Cy5, PE/Cy5.5, PE/Cy7 0.2 mg/ml
Purificato, Biotina, FITC, Alexa Fluor® 488, Alexa Fluor® 647, Alexa Fluor® 700, Pacific BlueTM 0.5 mg/ml
LEAFTM 1.0 mg/ml

Per gli anticorpi offerti per test, piastra o per Western blot, le concentrazioni variano in base all'ottimizzazione di ogni protocollo.

Devo fare uno studio funzionale. Di quale grado di purezza dovrò scegliere il mio anticorpo (cosa significa il formato di purezza LEAFTM )?
Gli anticorpi purificati della BioLegend contrassegnati dalla sigla LEAFTM (Low Endotoxin, Azide-Free) sono sviluppati con caratteristiche che meglio si adattano a protocolli per studi funzionali , fornendo le massime performance riducendo al minimo eventuali effetti negativi. Tutti gli anticorpi purificati LEAFTM vengono garantiti per sterilità e livelli di endotossina <0.01 ng/mg

Come scelgo il giusto controllo di isotipo per il mio anticorpo primario?
Per esempio, se avete un anticorpo primario coniugato PE con un isotipo Ratto IgG1,k dovrete utilizzare come isotipo di controllo Ratto IgG1,k marcato PE catalogo # 400407 o 400408.

CITOFLUORIMETRIA

Quali sono i migliori fluorocromi da utilizzare nel caso di colorazioni multiple in citofluorimetria?
Con un singolo laser a 488 nm, tre colorazioni possono essere eseguite con PE, FITC, e "tandem dye" PE/Cy5. Per colorazioni simultanee è necessario un apparecchio con laser multipli e fluorocromi APC, APC/Cy7 e PE-Cy7.

Qual è la differenza tra le coniugazioni PE/Cy5 e PE/Cy5.5?
Entrambi PE/Cy5 e PE/Cy5.5 vengono eccitati a 488 nm con un laser ad argon, ma l'emissione del PE/Cy5 ha un picco a 670 nm e l'emissione del PE/Cy5.5 ne ha uno a 690 nm. Quando usati insieme ad APC, il PE/Cy5.5 necessita di meno compensazione del PE/Cy5.

ELISA

Quali sono i componenti inclusi nei kit ELISA MAXTM Sets?
Gli ELISA MAXTM Standard Sets contengono i seguenti reagenti pre-titolati, Anticorpo di cattura, Anticorpo di rivelazione, Avidina-HRP e Proteina ricombinante come standard.
Gli ELISA MAXTM Deluxe Sets contengono tutto ciò descritto nei precedenti più, Piastre non coniugate, tampone di coniugazione, Assay Diluent e substrato TMB.

Gli ELISA MAXTM Deluxe Sets hanno le piastre già coniugate?
No, le piastre non sono coniugate ma il tampone di coniugazione, e l'Assay Diluent (per il bloccaggio e la diluizione) sono inclusi nel kit ELISA MAXTM Deluxe Sets. Le istruzioni dettagliate sulla metodica di coniugazione sono inserite nel manuale del prodotto.

Posso mischiare i reagenti di differenti ELISA MAXTM Sets, o usarli per altre applicazioni?
Non è consigliato. I reagenti per ELISA MAXTM sono ottimizzati per uno specifico lotto di produzione e non vengono suggeriti per applicazioni diverse dall'ELISA.

ELISPOT
Quante cellule devo mettere in ogni pozzetto? Cosa accade se aggiungo le cellule prima dell'antigene o del mitogeno?
Si raccomanda d'aggiungere da 3x105 a 1x106 cellule per pozzetto, dipende la protocollo/esperimento. Se le cellule vengono aggiunte prima dell'antigene o del mitogeno, gli spot potranno essere distribuite in maniera non uguale, sui bordi del pozzetto.

Come dovrei coniugare le piastre? Come dovrei conservarle dopo la coniugazione?
Evitare le bolle d'aria quando si coniuga la piastra, in quanto potrebbero creare delle macchie bianche sulla piastra. Le piastre coniugate dovrebbero essere conservate a 4°C in scatole umidificate. Per evitare contaminazione, mantenere condizioni di sterilità durante le procedure di coniugazione e incubazione.

Come devo lavare le mie piastre di ELISPOT?
Le piastre devono essere lavate utilizzando con al soluzione di lavaggio suggerita (senza toccare la membrana sul fondo del pozzetto) ed eliminando la soluzione rovesciando la piastra. Evitare di danneggiare la membrana usando un lavatore automatico.

WESTERN BLOTTING

Quali sono le possibili cause per un alto "Background" nel mio Western Blot?
Tamponi di trasferimento possono essere contaminati.
Lavaggio dopo l'aggiunta degli anticorpi non sono stati fatti con sufficiente tampone o tempo.
Tamponi di bloccaggio e incubazione non erano freschi o erano eccessivamente diluiti.
Quali sono le possibili cause della mancanza o debolezza di segnale nel mio Western Blot?
L'efficienza di trasferimento è stata debole. Controllare il trasferimento della proteina facendo una colorazione del gel e/o la membrana.
Sbagliato stoccaggio degli anticorpi o dei reagenti ECL per rivelazione western blot.
Insufficiente proteina caricata sul gel.
- Tempo d'esposizione della lastra potrebbe essere troppo corto.