Le inibitori delle chinasi sono diventate uno strumento importante per il trattamento di molte patologie. Upstate fornisce uno strumento importante e l’unico così vasto in ambito chinasi, che permette l’identificazione della selettività o meno di molecole oggetto di studio.
Uno strumento flessibile che permette un’elevata profilazione a seconda delle necessità del cliente, e in tempi alquanto ristretti.
I composti possono essere forniti dfal cliente come DMSO a concentrazioni conosciute, come solidi in fiale, oppure in piastre da 96 pozzetti. Questo servizio KinaseProfiler viene offerto nel tempo, conservando a seconda del volere del cliente i campioni iniziali per furure analisi. Contratti di confidenzialità e secondo guide del clienti sono garantite. Attualmente (ma il numero di chinasi aumenta ogni mese) si tratta di 200 chinasi.

                                                                                  33P
                                   ATP (33P)+Mg2+KINASE          |
Substrato++ ------------------------------------->        Substrato++ [su membrana caricata negativamente]

Kit per testate in casa 80 differenti chinasi sul piastra da 384 pozzetti in FP (fluorescenza polarizzata). Composta da peptidi fosforilano, gabellato in fluorescenza, e anticorpo fosfo specifico, ideale per caratterizzazione robotizzata. Un protocollo solo per 80 chinasi, valicato in un solo test, risparmio di tempo e riproducibilità assicurati.

• Ogni concentrazione ottimale viene suggerita nel test (per ogni enzima) e senza restrizioni su ATP
• Risparmio di tempo assicurato
• Validato con il sistema custom KinaseProfiler FP, volumi di campione minimi, ottimizzati
• Robusto con un valore Z’ notevole
• Migliaia di pubblicazioni supportono la tecnologia e i reagenti utilizzati in questi kits

PhosphataseProfiler

Le fosfatasi stanno diventando molecole di interesse farmacologico, con le chinasi, l’inibizione delle protein phosphatases è un  target primario nella lotta a molte patologie.
Upstate offre un pannello di protein e lipid phosphatases per selezionare il composto di elezione tra quelli considerati.
La regolazione che le fosfatasi compiono sulle funzioni cellulari, sono strettamente correlate a stimoli extracellulari, spesso legate ad altre proteine.
Ci sono molti esempi di difetti di regolazione di questi processi, dovuti a processi di mutazione o da cause patogene, tossine. Un esempio lampante è la coppia di fosfatasi PTB1B e PTEN attenua il segnale insulinico. Molti stanno sviluppando composti inibitori di queste due fosfatasi per la cura del diabete.

La famiglia genetica delle fosfatasi si compone di circa 120 enzimi che controllano la fosforilazione di molti lipidi e proteine e che regolano una vasta gamma di eventi cellulari.

Il servizio è per ora disponibile su 16 fosfatasi :
CD45 DUSP22, HePTB, LMPTP-A, LMPTB-B, MEG1, MEG2, PP1 alpha, PP2A, PTB beta, PTB-1B, SHP1, SHP2, TCPTP, VHR, YopH

Fornisce una curva di IC50 sui campioni forniti contro ogni phosphatase del PhosphataseProfiler oppure di Chinasi del KinaseProfiler.

La curva si prepara con 10 punti usando serie di diluizione semilogaritmiche (es una curca tipica si prepara usando queste concentrazioni: uM 100;30;10;3;1;0,3;0,1;0,03;0,01;0
Si può specificare la concentrazione massima voluta da usarsi.

Necessari minimo 100 uM di composto
Composti devono essere forniti al 50x della conc.massima in 100% DMSO

Servizio per PI-3 Kinase screening inibizione

Le Phosphoinositol-3-Kinases sono una famiglia di lipidi (chinasi) che mediano moltissimi segnali all’interno della cellula, sia in stati normali che alterati. La Classe 1A (PI 3-Kinase Beta, delta) e la classe 1B (PI 3-Kinase gamma) potrebbero essere attivata via il recettore delle tyrosine Kinasi o dalla coppia di recettori della Proteina G. Una volta attivati, generano fosfatidilinositolo 3,4,5 trifosfato (PiP3) associato al rilascio di Calcio e interazioni con host delle key-kinases com Akt PDK1.

Le chinasi Pi 3 sono state relazionate a moltissimi stati patologici, come la risposta allergica, cancro, ipertensione, contrattilità cardiaca, aterosclerosi, sepsi e malattie autoimmuni e disordini infiammatori; inoltre queste chinasi sono associate allo sviluppo neuronale, all’apoptosi, alla proliferazione e alla chemotassi.

Questo servizio di profiler utilizza la tecnica HTRF (Homogenous Time Resolved Fluorescence)